Пцр и посев на уреаплазму в чем разница
Что лучше: Бакпосев или ПЦР?
Многие пациенты, которым врач выдал направление сразу на несколько разных анализов, на форумах в интернете задают один и тот же вопрос:
что лучше – ПЦР или Бакпосев?
Как правило, мотивом становится нежелание платить за оба исследования, ведь ожидания пациента заключаются в подтверждении либо опровержении присутствия инфекции в организме. Вопрос о том, какое из названных исследований лучше, не совсем корректен – эти методы сильно отличаются. Бактериологический посев подразумевает под собой исследование биологического материала, помещенного в питательную среду, благоприятную для роста микроорганизмов. Так можно не только выявить типы бактерий, но и определить их чувствительность к антибиотикам. Для определения различных микроорганизмов производится забор материала практически с любого участка организма. Так, материалами для бакпосева на микроорганизмы,
вызывающие ИППП, выступают соскобы с половых органов и мазки из урогенитального тракта. Чаще всего бакпосев назначается для диагностики таких ИППП,
как трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз, хламидиоз и различные формы кандидоза.
Анализ методом ПЦР (полимеразной цепной реакции) позволяет обнаружить в забранном у пациента биологическом материале фрагменты ДНК, принадлежащие тому или иному виду бактерий. ПЦР-анализ является самым высокоэффективным методом обнаружения множества микроорганизмов, так как даже самое низкое число клеток возбудителя инфекции будет обнаружено. Помимо очевидных преимуществ, оба вида анализа обладают и явными недостатками.
Для бакпосева характерна высокая длительность исследования (от нескольких дней до нескольких недель, так как бактерии нужно выявить, а затем и вырастить), повышенные требования к забору биологического материала, а также повышенные требования к квалификации лаборантов. Все эти недостатки ведут к главному неудобству — к значительному удорожанию стоимости исследования и удлинению сроков лечения.
Метод ПЦР-диагностики автоматизирован и позволяет выявить инфекцию за 4-5 часов. При этом неважно, в какой стадии находится заболевание, анализ обнаружит присутствие даже единичных бактерий либо вирусов. Кроме того, мазок методом ПЦР выявляет возбудителей хламидиоза, уреаплазмоза, микоплазмоза и генитального герпеса, которые не обнаруживаются в мазке на флору.
Минусы метода ПЦР – это вероятность получения ложноположительного результата, возникающая по нескольким причинам. Например, если пациент недавно вылечил заболевание, вновь определившееся при ПЦР-анализе, то вполне вероятно, что исследование обнаружило уже мертвые, но еще не выведенные из организма клетки возбудителя. Противоположный результат – невыявленный возбудитель, который был определен другим анализом – возможен, если вирус или бактерия уже успели мутировать, и штаммы ПЦР не среагировали на «незнакомца». Кроме того, врачи стараются не назначать ПЦР-анализ на гарднереллез, так как присутствие небольшого количества этих бактерий во влагалище является нормой, и ПЦР их все равно определит.
С усовершенствованием метода ПЦР врачи все реже назначают пациентам прохождение бакпосева. Он считается незаменимым при наличии хронических форм ИППП, так как позволяет достаточно точно определить количество клеток возбудителя и его реакцию на антибиотики различных групп. Для определения острых форм инфекции более целесообразным является метод ПЦР-анализа. В конечном итоге, каким бы ни был результат того или иного исследования, достоверно расшифровать и сделать назначения по нему может только врач.
Методы диагностики ЗППП
Микробиологические исследования
Бактериоскопический метод (мазок на инфекции)
При бактериоскопическом методе анализ выполняется с помощью светового микроскопа. Исследуемый материал вносят в каплю физраствора, тщательно размешивают и распределяют по стеклу. Должно наступить хорошее окрашивание частей клеток и бактерий в разные цвета, чтобы оценить состав выделений из уретры, влагалища и шейки матки.
Перед сдачей мазка лучше воздержаться от мочеиспускания.
Бактериологический метод (бакпосев)
Бакпосев – метод диагностики ЗППП путем выращивания микробов в благоприятной для этого среде. Он является золотым стандартом в определении инфекций, поскольку выявляет не только вирус, но и его активность. Преимуществом данного метода является возможность не только выявить бактерию, но и возможность получить антибиотикограмму, на основе которой врач назначает точное лечение. Наиболее часто бакпосев используют для диагностики уреаплазмоза, микопламзоза, трихомониаза, хламидиоза, различных форм кандидоза.
Правила сдачи анализа на бакпосев:
Молекулярная диагностика
Серологические и иммунохимические исследования
ПИФ предусматривает прямое выявление антигенов хламидий.
ПИФ-метод является важнейшим скриниговым методом диагностики урогенитального хламидиоза.
Показания к назначению анализа:
Подготовка к исследованию: У женщин взятие биологического материала лучше всего проводить не ранее чем через 14 дней после менструации. Перед взятием материала пациентам рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов.
Материал для исследования: соскоб из уретры или цервикального канала, осадок мочи, секрет предстательной железы.
Недостатком данного метода является частота ложноположительных результатов на хламидиоз. При использовании метода прямой иммунофлюоресценции ложноположительный диагноз урогенитального хламидиоза ставится у 36% пациентов. В зарубежной практике установленный по ПИФ диагноз принято подтверждать с помощью культурального исследования.
Иммуноферментный анализ нацелен на выявление антител в крови. Соответственно, чем больше титр, тем больше антител к тому или иному инфекционному заболеванию. IgG – антитела говорят о перенесенном в прошлом инфекционном заболевании, а IgМ – антитела говорят о наличии острого инфекционного процесса. ИФА позволяет диагностировать:
Анализ на выявление уреаплазмоза
Уреаплазмоз – инфекционное заболевание мочеполовой системы, вызванное уреаплазма парвум и др., симптомы которого могут проявляться по-разному.
Симптомы уреаплазмоза
Проявления инфекции, вызванной уреаплазма парвум и др. могут быть сходными у мужчин и женщин. Часто наличие уреаплазмы сочетается с другими половыми инфекциями, поэтому симптомы могут изменяться под влиянием прочих возбудителей.
Уреаплазма: симптомы у мужчин
У мужчин признаками уреаплазмоза бывают хронические воспалительные процессы в простате (простатит), придатках (эпидидимит) или мочеиспускательном канале. Часто при этом присутствуют выделения из уретры, зуд и жжение в этой области, боли внизу живота.
При инфекции, которую вызвала уреаплазма, симптомы у мужчин могут также проявляться бесплодием. Уреаплазма парвум и др. способна проникать в сперматозоиды, нарушая их подвижность и снижая шансы на оплодотворение яйцеклетки.
Уреаплазма: симптомы у женщин
Проявления уреаплазмоза могут быть следующими:
• Выделения из половых путей;
• Неприятные ощущения при половом контакте;
• Боли внизу живота, а также в области уретры;
• Зуд в области мочеиспускательного канала;
• Частые воспаления органов мочеполовой системы и слизистых оболочек (вульвовагиниты, уретриты и др.).
У беременных женщин при инфекции, которую вызвала уреаплазма, симптомы и осложнения могут варьировать от хронических воспалений мочеполовых органов, до преждевременных родов или инфицирования плода. Поэтому активная уреаплазма при беременности повышает риски для матери и будущего ребёнка.
Лечение уреаплазмоза
При обнаружении уреаплазмы лечение проводится в случае, если микроб является причиной хронического воспаления, бесплодия и т.д. Если причиной заболевания явилась уреплазма, лечение назначается с применением антибиотиков. Выбор антибиотика должен осуществлять доктор, так как самолечение уреаплазмоза часто не только не приносит нужного результата, но и может привести к развитию устойчивости микроба к антибиотику. Так, за последние несколько лет нарастает число устойчивых к тетрациклину штаммов уреаплазма уреалитикум и парвум.
Особое значение имеет лечение уреаплазмы (парвум, уреалитикум) у мужчин и женщин при планировании беременности. Решение о лечении уреаплазмы парвум и др. при наступившей беременности принимается с учётом её срока, а также после тщательного взвешивания возможных рисков для ребёнка и матери со стороны уреаплазмы и антибиотикотерапии. Обычно лечение уреаплазмы при беременности стараются проводить на более поздних сроках (после 20 недели), когда влияние антибиотиков на развитие плода становится минимальным.
Диагностика уреаплазмоза
Чтобы поставить диагноз, необходимо сочетание клинической картины и лабораторных данных. Нужно помнить, что уреаплазма парвум и уреалитикум являются условно-патогенными микробами, поэтому не всегда можно устанавливать диагноз уреаплазмоза, опираясь только на результаты анализов. Точно также нельзя точно установить присутствие микробов Ureaplasma urealyticum, parvum и развитие заболевания только на основе клинических данных, без объективного лабораторного подтверждения.
Посев на уреаплазму парвум и уреалитикум у мужчин и женщин
Посев на уреаплазму является «золотым стандартом» диагностики уреаплазма парвум и других её видов. На питательные среды осуществляется посев отделяемого из мочеполовых путей.
При диагностике уреаплазмы у мужчин используется следующий материал для посева на уреаплазму парвум и др.: мазок из уретры, эякулят, секрет простаты. Для посева на уреаплазму у мужчин также можно использовать мочу.
Посев на уреаплазму парвум и др. у женщин берут с мазков из влагалища, уретры, шейки матки. Моча у женщин для посева на уреаплазму не используется.
Если спустя определённый промежуток времени на питательной среде получен рост уреаплазма парвум или другого её вида, то можно оценить результат и уточнить диагноз. В норме результат будет отрицательным, при наличии активности уреаплазма парвум и др. – положительным. При бессимптомном носительстве посев на уреаплазму имеет низкие показатели – менее 10 в 4 степени колониеобразующих единиц уреаплазмы/тампон/мл.
Показатели выше 10 в 4 степени по уреаплазме парвум и др. указывают на активацию инфекции. При результате от 10 в 4 степени в посеве на уреаплазму и выше определяют её чувствительность к антибиотикам. При показателях больше 10 в 4 кое/тампон/мл в посеве на уреаплазма парвум и др. микроб проверяется на чувствительность к разным видам антибиотиков, оценивается количественно, а также по характеру роста колонии. При показателях посева более 10 в 4 степени по уреаплазме лечение (выбор антибиотика) будет зависеть от этих характеристик.
Посев на уреаплазму парвум и др. проводится не только при подозрении на урогенитальную инфекцию, но и с целью контроля эффективности (если была обнаружена уреаплазма) лечения (примерно в конце второй недели после отмены препарата). Об успешности лечения можно судить по титру. Если результат посева обнаруживает титр менее 10 в 4 степени по уреаплазме, то имеется значительный положительный эффект от лечения. Если титр составляет более 10 в 4 степени по уреаплазме, то необходима коррекция лечения и его продолжение.
Уреаплазма парвум и уреалитикум, как условно-патогенный организм, слабо провоцируют иммунные реакции. Поэтому в крови не всегда удаётся выявить антитела к уреаплазма уреалитикум, парвум. Данный вид исследования при подозрении на уреаплазмоз является вспомогательным и может предоставить некоторую дополнительную информацию по характеру течения инфекции.
Обнаружение ДНК Ureaplasma urealyticum, parvum
Проводится с помощью методики ПЦР, которая позволяет выявлять частицы ДНК микроба, представленные в образце материала в количестве выше пороговых значений. Положительный результат анализа бывает при наличии инфекции, либо у носителей уреаплазмы, когда симптомы отсутствуют.
При наличии инфекции, которую могла вызвать уреаплазма, лечение проводится после лабораторного подтверждения. Для получения точного результата лабораторные исследования на уреаплазма парвум и др. должны осуществляться в комплексе.
Лабораторная диагностика урогенитального микоплазмоза и уреаплазмоза
Урогенитальный микоплазмоз и уреаплазмоз широко распространенные инфекции, передающиеся половым путем (ИППП).
Патогенными микоплазмами, т.е. вызывающими заболевания урогенитального тракта у мужчин и женщин, являются Mycoplasmahominis, Mycoplasmagenitaliumи Ureaplasmaurealyticum.
Исследования на выявление патогенных мико- и уреаплазм проводят в следующих случаях:
Достоверная диагностика урогенитального микоплазмоза и уреаплазмоза только на основании жалоб и внешнего осмотра пациента невозможна, поскольку у этой инфекции нет специфических клинических проявлений.
Для постановки диагноза в обязательном порядке требуется проведение соответствующего лабораторного исследования.
Методы исследования
На сегодняшний день существует три основных метода проведения анализов на микоплазму и уреаплазму — ИФА, ПЦР и бактериологический посев. Все они являются высокоточными способами диагностики, однако у каждого из методов есть свои особенности.
Бактериологический посев
Метод, названный «золотым стандартом» при обнаружении и определении количества возбудителя, кроме того, имея в своем распоряжении живую культуру бактерий конкретного пациента, специалист сможет проверить, как те или иные антибиотики будут воздействовать на нее и подобрать максимально эффективный препарат. Точность бактериологического исследования близка к 100%. Ждать результата придется не более 3-х дней.
Расшифровка результата: главный показатель результата бактериологического исследования — титр, то есть концентрация бактерий. Если титр меньше 10 4 КОЕ/мл, человек считается здоровым, пациенту выдается результат. Если титр больше — имеется инфекция, в рамках этого же анализа проводится исследование на чувствительность к антибактериальным препаратам.
В Областной больнице проводят:
— микробиологическое (культуральное) исследование на микоплазму (проводится определение Mycoplasma hominis);
— микробиологическое (культуральное) исследование на уреаплазму (проводится определение Ureaplasma urealyticum).
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Устанавливает присутствие искомого вида уреаплазм и микоплазм по их ДНК в образце. ПЦР — очень точный метод диагностики. Его точность приближается к 100%.
Расшифровка результата: анализ на микоплазму и уреаплазму, проведенный методом ПЦР, расшифровывается очень просто — возможно только два варианта: «не обнаружена» или «обнаружена». Если в бланке значится «не обнаружена», значит, ДНК микоплазм/уреаплазм данного вида в образце биоматериала отсутствует, если «обнаружена» — значит, микоплазмы/уреаплазмы есть.
Областная больница предлагает следующие услуги:
— молекулярно-биологическое исследование на микоплазму хоминис (Mycoplasma hominis), качественное исследование;
— молекулярно-биологическое исследование на микоплазму гениталиум (Mycoplasma genitalium), качественное исследование;
— молекулярно-биологическое исследование на уреаплазмы (Ureaplasma urealyticum, Ureaplasma parvum), качественное исследование.
Иммуноферментный анализ — ИФА
Позволяет выявить не бактерии, а антитела, которые наша иммунная система выработала при столкновении с инфекцией. Помимо установления факта наличия микоплазмоза и уруаплазмоза, ИФА позволяет определить, в какой стадии находится болезнь — в острой или хронической. Точность ИФА достаточно высока и доходит до 80%.
Расшифровка результата: при ИФА-исследовании возможно три варианта результата — «отрицательный», «положительный» и «сомнительный».
Следует понимать, что отрицательный результат еще не значит, что инфекции нет. Поскольку ИФА выявляет не саму инфекцию, а антитела к ней, отрицательный вариант может говорить как о том, что человек здоров, так и о том, что заражение произошло совсем недавно (менее 2 недель назад), или же иммунная система по какой–либо причине не сработала, как должна была.
Сомнительный результат может говорить как о наличии инфекции, так и о её отсутствии, в этом случае рекомендуется сдать анализ на микоплазмы и уреаплазмы еще раз через некоторое время.
Положительный результат говорит о наличии инфекции.
Положительный результат на определениеиммуноглобулинов класса A (IgA) говорит об остром либо хроническом заболевании.
Положительный результат на определение иммуноглобулинов класса G (IgG) свидетельствует об остром или перенесённом в прошлом заболевании либо о хроническом процессе.
Ложноположительный результат возможен в том случае, если инфекция была уничтожена совсем недавно или же антитела, которые выработались в качестве ответа на давно перенесенный микоплазмоз/уреаплазмоз, снова пришли в боевую готовность из–за иного инфекционного заболевания.
В Областной больнице проводятся следующие виды исследований:
— определение иммуноглобулинов класса A (IgA) к антигенам уреаплазмы уреалитикум (Ureaplasma urealyticum) в сыворотке крови;
— определение иммуноглобулинов класса G (IgG) к антигенам уреаплазмы уреалитикум (Ureaplasma urealyticum) в сыворотке крови;
— определение антител класса A (IgA) к микоплазме хоминис (Mycoplasma hominis) в крови;
— определение антител класса I (IgG) к микоплазме хоминис (Mycoplasma hominis) в крови.
Какие биологические жидкости исследуются
Тип биоматериала, необходимого для анализа на микоплазму, зависит от способа исследования.
Кровь из вены позволяет провести ИФА-анализ.
Для бактериологического посева и ПЦР-анализа:
— У женщин исследуют вагинальные, цервикальные мазки и первую порцию мочи. Реже анализируют пробы из уретры.
— У мужчин производится взятие мазка из уретры и первой порции мочи. Редко исследуется секрет предстательной железы и эякулят.
Как берут биоматериал на анализ
Для повышения точности и снижения риска ошибки к сдаче анализа на микоплазму и уреаплазму следует подготовиться.
— Кровь на анализ сдают утром натощак. За сутки до исследования не рекомендуется перенапрягаться и принимать алкоголь.
— Если на анализ сдается моча, требуется собрать первую утреннюю порцию. Если это по каким–то причинам невозможно, моча, которая сдается на анализ, должна собираться как минимум через 3 часа после последнего мочеиспускания. Женщины должны сдавать мочу за 1–2 дня до менструации или через 2–3 дня после ее окончания.
— Мазок (соскоб) из урогенитального тракта. Как минимум за 2–3 дня до взятия биоматериала следует прекратить пользоваться антибактериальными средствами для интимной гигиены, женщинам стоит также отказаться от любых вагинальных спреев, кремов, мазей, свечей, а также тампонов и спринцевания. В день взятия мазка можно принять душ без использования моющих средств.
Кровь на анализ, так же как моча и мазок, сдается через месяц после завершения курса лечения антибиотиками.
Важно отметить
Время доставки в нашу лабораторию не превышает регламентированных для данных исследований 2-х часов, пункты взятия и место проведения анализа находятся в шаговой доступности друг от друга. Для сохранения жизнеспособности мико- и уреаплазм используется специальная транспортная среда в которую погружаются тампоны с биопробами из урогенитального тракта (мазки/соскобы). Доставка осуществляется в специальных термоконтейнерах при температурном режиме, который сохраняет свойства биоматериала для конкретного лабораторного анализа.
Эти условия обеспечивают сохранение живых микроорганизмов в случае их наличия в материале, что снижает вероятность получения ложного результата.
Уреаплазма: мифы и реальность
Давайте поговорим об уреаплазме. Что это за диагноз нашего времени – «уреаплазмоз»? Я заведомо ставлю данный термин в кавычки, так как он не совсем корректен. Постараюсь объяснить причину.
Почему слово уреаплазма наводит такой ужас на большинство пациентов? Да потому, что сведения о ней настолько противоречивы и разнообразны, что даже среди коллег-врачей нет четкой и однозначной позиции.
Попробуем разобраться по порядку.
Что такое уреаплазма
Особенность данного микроорганизма в том, что у него нет клеточной оболочки, поэтому вылечить уреаплазму с помощью антибактериальных препаратов сложно, так их действие основано на повреждении клеточной мембраны.
Так ли важно лечить уреаплазму
Уреаплазма обнаруживается в мочеполовом тракте у 75%-80% (по некоторым данным) здоровых женщин. Поэтому она однозначно относится к условно-патогенной флоре. Если при регулярном осмотре, проводимом вашим гинекологом, по результатам ПЦР у вас обнаружена уреаплазма, не стоит сразу начинать лечение. Повторюсь, уреаплазма – нормальная флора человеческого организма.
Когда стоит обратиться к врачу
В лечении нуждаются только те женщины, у которых носительство уреаплазмы сопровождается симптоматикой и жалобами, и в том случае, когда все другие, наиболее вероятные возбудители воспалительного процесса исключены (например, хламидия, трихомонада, гонорея, микоплазма).
Что может беспокоить женщину (симптомы):
Уреаплазма и беременность
Несмотря на многочисленные споры о влиянии уреаплазмы на течение и исход беременности, до сих пор нет единого мнения относительно тактики лечения данной группы женщин. Ранее этот микроорганизм «обвиняли» в преждевременных родах, в самопроизвольных выкидышах. Исследования на сегодняшний день опровергли вышесказанное. Например, эксперты Центра по контролю и профилактике заболеваний США (CDC, 2010) не считают доказанной этиологическую роль и клиническое значение уреаплазм. При сочетании же уреаплазмы с другими инфекционными возбудителями (хламидия, трихомонада, гонорея, микоплазма) антибактериальное лечение необходимо! И проводить его нужно с учетом чувствительности вышеуказанных микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Рутинное скрининговое обследование беременных женщин на уреаплазму не проводят.
В завершение хочу сказать, бояться уреаплазмы не нужно. Запомните, лечение ваш гинеколог должен проводить только с учетом всей клинической картины, а не на основании обычно проведенных анализов.
Материал подготовила Кузина Анастасия Вадимовна, врач акушер-гинеколог, врач ультразвуковой диагностики.