Кардиолипиновый антиген что показывает
Диагностика сифилиса в реакции микропреципитации
АНТИГЕН КАРДИОЛИПИНОВЫЙ ДЛЯ РЕАКЦИИ МИКРОПРЕЦИПИТАЦИИ
(Сифилис-АгКЛ-РМП)
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор применяется при диагностике сифилиса для исследования плазмы или инактивированной сыворотки в реакции микропреципитации (РМП).
Набор рассчитан на проведение 1000 определений.
ПРИНЦИП МЕТОДА
В антигенных структурах Treponema pallidum имеется липопротеиновый антиген, в ответ на который в организме больного формируются «реагины», представляющие собой смесь антител классов M и G. Реагины появляются в сыворотке нелеченных больных через 2-3 недели, а в спинно-мозговой жидкости через 4-8 недель после заражения. Антигенный комплекс, возникающий в спиртовом растворе кардиолипина, лецитина и холестерина (АгКЛ), способен связываться с реагинами, что и регистрируется в реакции микропреципитации (выпадение хлопьев разной величины).
СОСТАВ НАБОРА:
Реагент 2 – раствор холин-хлорида в 0,9 % растворе натрия хлористого; 2 флакона (по 5,0 мл).
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ПРОБЫ
Реакцию проводят с плазмой или инактивированной сывороткой обследуемых лиц. Для постановки реакции кровь берут из пальца. Перед взятием крови в пробирку вносят 5,0%-ный раствор натрия лимоннокислого, взятого капилляром аппарата Панченкова до метки “50”. Затем тем же капилляром набирают кровь дважды до отметки “0” и вносят в ту же пробирку, перемешивают с раствором натрия лимоннокислого и центрифугируют (если необходимо вскоре после взятия крови приступить к исследованию) при 1000-2000 об/мин в течение 15 минут.
Полученную плазму используют для проведения реакции микропреципитации. При постановке реакции с сывороткой кровь берут из вены в объеме 5-10 мл, отделяют ее от сгустка, инактивируют при температуре (56+1) 0 С в течение 30 мин и используют в реакции.
Пробы, предназначенные для исследования, могут храниться до 5 дней при температуре (6+2) о С или не более 6 недель при минус 20 о С.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ
Потенциальный риск применения набора – класс 1.
Меры предосторожности – соблюдение “Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР” (Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ:
· Центрифуга лабораторная, обеспечивающая угловую скорость 1000-2000 об/мин;
· термостат или водяная баня, обеспечивающие температуру прогревания (37+1) 0 С или (56+1) 0 С, соответственно;
· пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02 и 5,0 мл;
· пробирки вместимостью 10 мл;
· вода очищенная (дистиллированная или деионизированная);
· 0,9% раствор натрия хлористого;
· стекло или пластина из плексигласа;
· перчатки резиновые или пластиковые.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА
Приготовление эмульсии АгКЛ
Перед приготовлением эмульсии проверить прозрачность ампулированного антигена. При выпадении кристаллов холестерина их растворить нагреванием ампул в термостате или водяной бане при температуре (37+1) 0 С или (56+1) 0 С, соответственно.
К определенному объему 0,9 % раствора натрия хлористого добавить равный объем антигена кардиолипинового. Смесь перемешать и оставить при комнатной температуре на 30 мин, после чего центрифугировать при 1000-2000 об/мин в течение 15 мин. Надосадочную жидкость слить. К осадку добавить 3,5 объема (по отношению к взятому антигену) 10 % раствора холин-хлорида на 0,9 % растворе натрия хлористого.
Хранить антигенную эмульсию в плотно закрытой стеклянной емкости без доступа света не более 6 сут. при температуре (4+2) 0 С.
Допускается хранение антигенной эмульсии при комнатной температуре в течение 14 сут. при условии внесения в нее мертиолята натрия до конечной концентрации 0,01 %.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
На обычное стекло или углубление пластинки из плексигласа наносят 3 капли нативной плазмы или инактивированной сыворотки, затем добавляют 1 каплю антигенной эмульсии. Ингредиенты перемешивают покачиванием пластины в течение 5 мин, затем в каждую лунку добавляют по три капли 0,9 % раствора натрия хлористого, вновь перемешивают покачиванием пластины и оставляют при комнатной температуре на 5 мин (оптимальный температурный режим реакции 23-28 0 С).
Учет результатов реакции
Результаты реакции учитываются при освещении не ниже 300 люкс. При исследовании плазмы или инактивированной сыворотки от больных сифилисом наблюдается положительная реакция в виде выпадения хлопьев разной величины, а с плазмой или инактивированной сывороткой от здоровых лиц наблюдается отрицательная реакция в виде опалесценции.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя в сухом, защищенном от прямых солнечных лучей месте при температуре от 10 до 25 о С в течение всего срока годности. Замораживание не допускается.
Срок годности набора – 1 год.
По вопросам приобретения и использования набора следует обращаться по адресу: Ташкент, ул.Мавлянова, 26/1. ООО «Denis Med»; тел. (8-371) 235-42-44, 235-15-84, 233-64-59.
Антитела к кардиолипину
Описание исследования
Присутствие антител классов lgG и lgM к кардиолипину (или представителей одного из них) в большинстве случаев являются маркером антифосфолипидного синдрома (АФС). В совокупности с исследованием уровня волчаночного антикоагулянта и уровня антител к бета-2-гликопротеину 1 эти исследования составляют комплекс лабораторных критериев АФС. Наличие данных антител свидетельствует о высокой вероятности развития системной красной волчанки (их присутствие выявляется у 20-50 % больных этой патологией и у 3-20% с другими системными ревматическими болезнями).
Присутствие антител класса М при антифосфолипидном синдроме связывают со следующими проявлениями:
Чем выше уровень антител, тем более высока вероятность возникновения тромбоза.
Наличие АФС считается подтвержденным иммунологическим методом в том случае, если при повторных исследованиях наблюдается стабильно высокий уровень антител с сохранением такового через 12 недель.
Исследование уровня антител класса lgG является первичным тестом, применяемым для диагностики антитфосфодипидного синдрома. Наличие антител этого класса связывают с возникновением необъяснимых тромбозов, повторными срывами беременности (обычно на средних и больших сроках), повышенной кровоточивостью. Исследования показали, что аутоантитела, которые принимают участие в процессе развития АФС, вступают в реакцию не с фосфолипидами как таковыми: предметом их «внимания» являются определенные домены (участки полипептидной цепи) белка, сродные отрицательно заряженным фосфолипидам (одним из главных представителей таковых является бета-2гликопротеин 1, выполняющий функцию снижения свертываемости крови).
Наружным слоем клеток зародыша (трофобластом) производится выделение анионных фосфолипидов клеточной мембраны. Они обладают способностью образовывать соединения с бета-2-гликопротеином 1. При возникновении связей антифосфолипидных аутоантител с этими молекулами может нарушаться:
В конечном счете, это приводит к развитию бесплодия или невынашиванию беременности.
Внутри организма антифософолипидные антитела являются причинной тромбозов глубоких вен, инсультов. Это происходит вследствие изменения ими свойств тромбоцитов (элементов крови, обеспечивающих ее свертываемость) и эндотелия (наружного слоя клеток внутренней поверхности кровеносных сосудов).
Уровень антикардиолипиновых аутоантител повышается практически у половины людей со средним возрастом 81 год. Аутоантитела также обнаруживаются при следующих состояниях:
Получение положительного результата должно быть обязательно подтверждено повторным тестом через 6 недель, т.к. острые инфекции характеризуются временным присутствием аутоантител. Если средний или высокий титр устойчиво сохраняется, в крови обнаруживается волчаночный антикоагулянт, и присутствуют характерные симптомы заболевания, то есть повод говорить о наличии антифосфолипидного синдрома.
Если присутствие антител класса М характерно для начальной стадии аутоиммунных заболеваний, то выявление антител lgG – это показатель прогресса или обострения уже имеющихся патологий. Именно присутствие этих антител наиболее часто связывают с хроническими срывами беременности, тромбозами, тромбоцитопенией, неврологическими симптомами, характерными для антифосфолипидного синдрома.
Подготовка к исследованию
Материал для анализа рекомендуется сдавать утром натощак, после 8-12 часового перерыва между приемами пищи.
Важно. Забор крови не рекомендуется проводить после инструментальных, мануальных, ректальных, ультразвуковых, рентгеновских обследований, физиопроцедур и прочих манипуляций.
Показания к исследованию
Тестирование проводится с целью диагностики антифосфолипидного синдрома:
Интерпретация исследования
Количество антител к кардиолипину измеряется в единицах на миллилитр (ед/мл).
Повышенное содержание антител lgM или lgG является показателем возможного наличия антифосфолипидного синдрома и вероятности развития симптомов, характерных для данного состояния.
Повышенный уровень антител lgG свидетельствует:
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванова Евдокия Ивановна Пол: ж Год рождения: 01.01.0000
Дата исследования: 12.12.0000
Исследование
Результат
Нормы интерпретации
Примечание
[160] Антитела к кардиолипину
Антитела к кардиолипину lgA,lgM,lgG
Описание
Антитела к кардиолипину lgA, lgM, lgG — скрининговый тест, использующийся в диагностике антифосфолипидного синдрома.
Антитела к кардиолипину и антифосфолипидный синдром
В клинической практике определение антител к кардиолипину является одним из наиболее ценных и стандартизированных тестов для диагностики антифосфолипидного синдрома (АФС). Антитела к кардиолипину являются основной фракцией антител к фосфолипидам. Эти антитела обнаруживаются при различных аутоиммунных заболеваниях. Их присутствие у пациентов с системной красной волчанкой (СКВ) ассоциируется с развитием тромбозов.
Титры антител к кардиолипину обычно максимальны непосредственно перед развитием тромбоза, и несколько снижаются сразу после его возникновения, что свидетельствует об их потреблении в процессе коагуляции. Увеличение титра антител к кардиолипину при развитии клинической картины тромбоза служит основой для постановки диагноза АФС. В России частота обнаружения антител к кардиолипину у пациенток с привычным невынашиванием беременности составляет 28–31%. Среди наиболее частых индукторов антител к кардиолипину описаны инфекции, вызванные вирусом гепатита С, ВИЧ, вирусом Эпштейна-Барр, парвовирусом В19, стрептококками, H/pylori, а также возбудителями сальмонеллёза и инфекций мочевыводящих путей. При лечении АФС, концентрация антител к кардиолипину может меняться или оставаться на прежнем уровне.
Рекомендуется плановое определение антител к кардиолипину у беременных с СКВ или тромбозом для оценки риска осложнений беременности. Для прогнозирования риска развития тромботических осложнений очень полезно определение волчаночного антикоагулянта (исследование 20.106 — Волчаночный антикоагулянт) и антител к кардиолипину.
Показания
Диагностика антифосфолипидного синдрома (необъяснимые тромбозы, бесплодие и повторное невынашивание плода, тромбоцитопения).
Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак или спустя 4–6 часов после последнего приема пищи. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.
Сифилис RPR, антикардиолипиновый тест
Описание
Сифилис (люэс) — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передающееся в основном половым путем, склонное к хроническому течению и поражающее большинство органов и систем организма.
RPR — неспецифический скрининговый тест (модификация RW), выявляющий иммуноглобулины класса IgG и IgM к фосфолипидам, выделяющимся из повреждённых клеток пациента больного сифилисом.
Тест RPR рекомендован приказом МЗ РФ для первичного скрининга и наблюдения за ходом терапии сифилиса.
Антифосфолипидные антитела
Антифосфолипидные антитела, выявляемые RPR, находят у 70–80% пациентов с первичным сифилисом и почти у 100% пациентов с вторичным и ранним латентным сифилисом. Чаще всего положительная RPR-реакция наблюдается через 3–5 недель после инфицирования или на 7–10 день после появления первичного шанкра. В 90–98% случаев после лечения сифилиса результат RPR-теста становится отрицательным.
Тест RPR неспецифический, поэтому возможно возникновение ложноположительных реакций. Антифосфолипидные антитела появляются не только вследствие сифилиса, но и в ответ на развитие нетрепонемных заболеваний острой или хронической природы, при которых наблюдается повреждение тканей (например, при аутоиммунных заболеваниях).
При получении позитивного RPR-теста, пациент в обязательном порядке должен пройти обследование у венеролога с повторным исследованием крови с помощью специфического трепонемного теста на диагностику сифилиса Трепонема паллидум.
Изредка RPR может дать ложноотрицательный результат (это обусловлено сверхвысоким титром антифосфолипидных антител), эта ситуация исключается при одновременном назначении RPR и диагностики сифилиса Т. pallidum. Совместное проведение тестов RPR и ИФА-теста IgG/IgM представляет лучший вариант скринингового исследования для обнаружения или исключения сифилиса на всех стадиях.
Интерпретация результатов
Референсные значения: отрицательно.
АТ к кардиолипину (скрин. IgG, IgM, IgA) в Москве
Приём и исследование биоматериала
Подробное описание исследования
Антитела к кардиолипину — это антитела к фосфолипидам клеточных мембран, ведущий показатель наличия антифосфолипидного синдрома у больных. Антитела к кардиолипину являются основной фракцией антител к фосфолипидам. Определенный уровень аутоантител к кардиолипину присутствует в крови и здоровых людей, но при повышении их уровня возникает качественно новое состояние в системе гемостаза. Эти антитела взаимодействуют с фосфолипидами мембран тромбоцитов и эндотелиальных клеток сосудов, вызывая их разрушение и способствуя возникновению тромбозов и тромбоэмболий.
Нарастание уровня антител является чувствительным и специфическим лабораторным тестом, характеризующим риск возникновения тромботических осложнений. Больные, у которых обнаружен повышенный уровень антител к кардиолипину, относятся к группе риска по возникновению тромбозов при различных заболеваниях. При беременности из-за тромбоэмболических повреждений трофобласта и плаценты возможны гибель плода, выкидыш, отслойка плаценты, гипотрофия и гипоксия плода. При лечении АФС концентрация антител к кардиолипину может меняться, а может оставаться на прежнем уровне. Антитела класса IgМ наиболее быстро реагируют (их уровень снижается) на эффективное лечение АФС. Низкие уровни антител к кардиолипину класса IgМ могут быть обнаружены при ревматоидном артрите, синдроме Шегрена, лекарственно-индуцированной красной волчанке, болезни Лайма и сифилисе. Антитела к кардиолипину могут быть выявлены при следующих заболеваниях: тромбоцитопениях, гемолитической анемии, аутоиммунных заболеваниях, системной красной волчанке, ревматоидном артрите, ревматизме, узелковом периартериите, инфаркте миокарда, инсульте, нестабильной стенокардии, инфекциях (туберкулез, лепра, стафилококковая, стрептококковая инфекции, корь, мононуклеоз, краснуха, СПИД), артериальной гипертензии, облитерирующем эндартериите, системном атеросклерозе, угрозе развития тромботических осложнений, акушерской патологии с развитием АФС. Относительный риск развития инсультов, выкидышей или тромбозов глубоких вен у больных, имеющих в крови антитела к кардиолипину, в 2-4 раза выше, чем у пациентов, у которых они отсутствуют.