зачем в структуре микробиологической лаборатории выделены чистые и грязные зоны
Микроскопировать готовые мазки-препараты с использованием иммерсионной системы
Тема: «Введение в микробиологию»
Задание №1 Вставьте пропущенные слова в тексте:
Медицинская микробиология изучает возбудителей инфекционных заболеваний человека. Микроорганизмы вызывающие различные болезни относятся к:
Все они имеют микроскопические размеры и могут быть выявлены и изучены только лишь при помощи специальных оптических приборов – микроскопов.
Задание№2. Почему микробиология является научно-практической дисциплиной?
Микробиология с точки зрения науки изучает микроорганизмы – микробы, их биологические признаки и взаимоотношения с другими организмами. Как практическая дисциплина микробиология выполняет диагностику заболеваний, разрабатывает методы создания специальных средств профилактики ( вакцины) и терапии ( иммунные сываоротки).
Устройство микробиологической лаборатории
Задание№2 Ответьте на вопросы:
1. Какое назначение микробиологической лаборатории?
Микробиологические лаборатории предназначены для обнаружения в экспериментальных условиях микроорганизмов в исследуемом материале и определении их видовой принадлежности.
2. Чем отличаются задачи, стоящие перед микробиологическими лабораториями ЛПУ и ФГУЗ «Центра гигиены и эпидемиологии»?
В лабораториях ЛПУ проводятся исследования с целью диагностики инфекционных заболеваний и контроля за санитарно-микробиологическим состоянием объектов внешней среды ЛПУ. В лабораториях ФГУЗ микробиологические исследования направлены на выявление источника инфекции, установления микробоносителей, а также для санитарно-микробиологического исследования объектов внешней среды (почвы, воды, воздуха, пищевых продуктов, смывов с рук и др.)
3. Зачем в структуре микробиологической лаборатории выделены «чистые» и «грязные» зоны?
В структуре микробиологической лаборатории «чистые» и «грязные зоны должны обеспечивать проточность продвижения патогенных микроорганизмов по грязной зоне и недопущение попадания их в чистую зону.
4. Какие структурные подразделения выделяют в микробиологических лабораториях?
5. Какие принципы положены в основу техники безопасности в микробиологической лаборатории?
· Запрет работы с пипеткой при помощи рта
· Запрет приема пищи, питья, курения, хранения пищи и применения косметических средств в рабочих помещениях
· Поддержание чистоты и порядка
· Дезинфекция рабочих поверхностей не реже 1 раза в день и после каждого попадания на них заразного материала
· Мытье рук персоналом после работы с заразным материалом, животными, перед уходом из лаборатории
· Проведение всех работ таким образом, чтобы свести к минимуму возможность образования аэрозоля
· Обеззараживание всех инфицированных материалов перед выбросом или повторным использованием
Знакомство с техникой микроскопирования
Задание №2 Ответьте на поставленные вопросы
1. Зачем используется иммерсионная система при микроскопировании?
Иммерсионная система при микроскопировании используется для усиления яркости и расширения пределов увеличения изображения
2. С помощью чего достигается увеличение разрешающей способности при использовании иммерсионной системы?
Увеличение разрешающей способности достигается путем применения иммерсионной жидкости. В качестве иммерсионной жидкости используют: кедровое масло, водный раствор глицерина, физиологический раствор, вода, вазелиновое масло.
Микроскопировать готовые мазки-препараты с использованием иммерсионной системы
Задание: Ответьте на поставленные вопросы
1. С какой целью окрашивают мазки-препараты?
Мазки- препараты окрашиваются с целью определения формы микробной клетки, наличие или отсутствия специфических органоидов микробной клетки, расположения микробной клетки в мазке, тинкториальных свойств.
2. Какие морфологические формы выделяют среди кокков?
3. Какие морфологические формы выделяют среди палочковидных бактерий?
· По способности к спорообразованию
· По расположению в мазке
· По характеру края клетки
-с закругленными краями
-с утолщенными концами
4. Чем отличается морфотип спирохет от спирилл?
Спирохеты отличаются от спирилл активной подвижностью, обусловленной сгибательными движениями клетки.
5. Какую морфологию имеет вибрион?
Холерный вибрион имеет один полярный жгутик, часто напоминает запятую (запятая Коха). Важный диагностический признак – подвижность. Морфологически изменчивы. Хорошо окрашиваются водным фуксином Пффейфера и карболовым фуксином Циля.
6. Чем отличаются бациллы от клостридий?
У бацилл спора не превышает размер ее диаметра, а у клостридий размер споры превышает ее диаметр, из-за этого имеет форму веретена.
7. Является ли морфотип дифференцирующим признаком?
8. Какие свойства бактерий можно рассмотреть с помощью микроскопа?
Лекция по микробиологии Микробиологическая лаборатория
Лекция №2 Микробиологическая лаборатория.
В зависимости от выполняемых исследований микробиологические лаборатории подразделяют на диагностические, производственные и научно-исследовательские.
В соответствии с типами микроорганизмов, изучаемых в них, выделяют бактериологические, вирусологические, микологические и протозоологические лаборатории.
С возбудителями инфекционных заболеваний работают только в специализированных лабораториях, обеспечивающих безопасность её персонала и невозможность «утечки» патогенных микроорганизмов за пределы лаборатории.
Группы возбудителей инфекционных заболеваний
Регламентация условий работы с возбудителями инфекционных заболеваний проводится в соответствии со степенью опасности микроорганизмов для человека. По этому признаку выделено четыре группы возбудителей.
Группа I: возбудители особо опасных инфекций (чума, натуральная оспа, лихорадки Ласса, Эбола и др.).
Группа II: возбудители высококонтагиозных бактериальных грибковых и вирусных инфекций (сибирская язва, холера, лихорадка Скалистых гор, сыпной тиф, бластомикоз, бешенство и др.). В эту группу также включён ботулотоксин (но не сам возбудитель ботулизма).
Группа III: возбудители бактериальных грибковых, вирусных и протозойных инфекций, выделенные в отдельные нозологические формы (возбудители коклюша, столбняка, ботулизма, туберкулёза, кандидоза, малярии, лейшманиоза, гриппа, полиомиелита и др.). В эту группу также включены аттенуированные штаммы бактерий групп I, II и III.
Группа IV: возбудители бактериальных, вирусных, грибковых септицемий, менингитов, пневмоний, энтеритов, токсикоинфекций и острых отравлений, а также возбудители анаэробных газовых инфекций, синегнойной инфекции, аспергиллёза, амебиаза, аденовирусы, герпесвирусы и др.
Лаборатории разных групп риска.
В зависимости от уровня безопасности работы с микроорганизмами лаборатории подразделяют на четыре группы риска.
Первая группа риска: лаборатории особого режима (максимально изолированные) с высоким индивидуальным и общественным риском.
Вторая группа риска: режимные лаборатории (изолированные) с высоким индивидуальным и низким общественным риском.
Третья группа риска: базовые (основные) лаборатории с умеренным индивидуальным и ограниченным общественным риском.
Четвёртая группа риска: базовые (основные) лаборатории с низким индивидуальным и общественным риском.
В соответствии с выполняемыми задачами выделяют:
бактериологические лаборатории в составе ЛПУ;
бактериологические лаборатории в составе комитетов Госсанэпиднадзора;
учебные бактериологические лаборатории вузов;
проблемные и отраслевые бактериологические лаборатории научно-исследовательских институтов и предприятий по выпуску бактерийных препаратов;
специализированные бактериологические лаборатории по контролю за особо опасными инфекциями;
специализированные бактериологические лаборатории по контролю за отдельными группами бактерий: микобактериями, риккетсиями, лептоспирами и др.
Большая часть микробиологических лабораторий работает с ПБА III и IV групп, а изучением возбудителей особо опасных инфекций (группы I и II) занимаются только специализированные лаборатории.
Требования к организации работы с ПБА групп опасности III и IV.
1. Базовые лаборатории, работающие с ПБА групп III и IV, должны располагаться в отдельном здании или в изолированной части здания.
2. Они должны иметь два выхода: один для сотрудников, другой — для доставки материала для исследований (допускается передача материала через передаточное окно). В лабораториях вузов, научно-исследовательских институтов и на предприятиях по выпуску бактерийных препаратов допускается наличие одного входа.
3. Лаборатории должны иметь необходимый набор помещений в соответствии с производственной мощностью и номенклатурой выполняемых исследований.
4. В помещениях должны быть проведены водопровод, электричество, отопление и вентиляция. В системе водоснабжения должны быть предусмотрены раздельные сети подачи воды для лабораторных исследований и бытовых нужд (сеть питьевой воды). Последняя должна быть защищена от обратного тока воды из лабораторной сети.
5. Вентиляция должна быть приточно-вытяжной, при этом наиболее низкое давление вытяжной вентиляции должно быть в помещениях с наибольшей опасностью инфицирования. При необходимости вентиляцию следует оснастить фильтрами тонкой очистки воздуха.
6. Помещения должны иметь естественное и искусственное освещение.
Каждая лаборатория должна иметь «чистую» и «грязную» зоны. Их планировка и размещение оборудования должны обеспечивать «проточность>> продвижения ПБА по «грязной» зоне.
«Грязная» зона включает помещения для приёма и регистрации материала, боксы и комнаты для проведения микробиологических исследований, помещения для проведения серологических исследований, комната для проведения люминесцентной микроскопии, термостатная, автоклавная для обеззараживания материала. Окна и двери всех помещений должны герметично закрываться. Приточно-вытяжная вентиляция «грязной» зоны должна быть оборудована фильтрами тонкой очистки выбрасываемого воздуха. Помещения для проведения работ с живыми ПБА должны быть оборудованы бактерицидными лампами. Обязательна маркировка автоклавов, столов, стеллажей для чистого и инфицированного материала. Покрытие лабораторной мебели, поверхности пола, стен и потолка должны быть гладкими и устойчивыми к действию моющих и дезинфицирующих средств.
«Чистая» зона включает гардероб для верхней одежды, комнаты отдыха, комнату для работы с документацией, комнату для надевания рабочей одежды, подсобные помещения, душевую, туалет, помещения для предварительных работ (препараторская, моечная, комната приготовления и разлива питательных сред и др.), стерилизационную, помещения с холодильниками для хранения питательных сред и диагностических препаратов. В «чистой» зоне возможна работа с неживыми ПБА (серологические и биохимические исследования).
Требования к проведению работ в микробиологической лаборатории
Правила работы в бактериологической лаборатории:
1. К работе допускаются лица, прошедшие специальный инструктаж о правилах работы в баклаборатории.
2. Каждый сотрудник должен иметь индивидуальную спецодежду (халат, шапочку)
3. Запрещено выходить из лаборатории в спецодежде и надевать поверх неё верхнюю одежду
4. Обязательное выполнение правил личной гигиены
5. Не допускается прием пищи и курение в баклаборатории
6. Хранение личных вещей должно быть организовано в комнате для медперсонала
7. После окончания работы обязательно проводится влажная уборка всех помещений с применением дезрастворов
8. При загрязнении патогенным материалом необходимо: а) мебель обработать дезраствором, б) лабораторную посуду стерилизовать, в) руки сначала обработать дезраствором, а затем тщательно вымыть с мылом.
9. Не допускать лишних хождений, резких движений, посторонних разговоров.
Правила работы с культурой патогенных микроорганизмов:
1. Доставлять инфицированный материал в лабораторию и переносить его из одной лаборатории в другую на территории учреждения нужно в специально приспособленной посуде (металлических биксах, ящиках, баках)
2. Весь материал, поступивший в баклабораторию, должен рассматриваться как инфицированный
3. При распаковке присланного заразного материала необходимо соблюдать осторожность. Банки, содержащие материал для исследования, при получении обтирают снаружи дезраствором и ставят на подносы или кюветы.
4. О случаях аварии с посудой, содержащей патогенный материал, следует немедленно сообщить зав. лабораторией и немедленно провести обеззараживание объектов и обеззараживание рук, других частей тела и спецодежду.
5. Перед работой следует проверить качество посуды, пипеток, шприцев и другого оборудования.
6. При работе с культурой патогенных микроорганизмов необходимо строго соблюдать общепринятые в бактериологической практике технические приемы, исключающие возможность соприкосновения рук с заразным материалом:
— с инфицированным материалом работают только с помощью инструментов (пинцеты, петли, корнцанги),
— прикасаться руками к исследуемому материалу и конденсату в засеянных чашках запрещается,
— перед работой тщательно проверяют целостность стеклянной посуды, проходимость игл и надежность поршней шприцев,
— при посеве материала делают надпись на пробирках, чашках Петри, колбах, флаконах с указанием номера анализа (культуры) и даты посева,
— в пробирки и чашки Петри материал высевают вблизи от огня горелки с обжиганием петли, шпателя, краев пробирки,
— растворы, содержащие патогенные микроорганизмы, набирают пипеткой с помощью резинового баллона,
— насасывать ртом и переливать растворы из сосуда в сосуд через край нельзя
— по окончанию работы запрещается оставлять на рабочих столах нефиксированные мазки, чашки Петри, пробирки и другую посуду с инфицированным материалом, все объекты, содержащие ПБА, должны быть убраны в хранилища (холодильники, термостаты, шкафы) с обязательной дезинфекцией столов. Использованные пипетки полностью (вертикально) погружают в дезинфицирующий раствор, избегая образования пузырьков в каналах. Остатки ПБА, использованную посуду и оборудование собирают в закрывающиеся ёмкости и передают в автоклавную.
-категорически запрещено сливать отходы с ПБА в канализацию без предварительного обеззараживания.
— после окончания работы с ПБА и заражёнными животными, а также после ухода из лаборатории следует тщательно вымыть руки.
7. Заразный материал и отработанные культуры подлежат обязательному уничтожению. Инструменты, используемые в работе с заразным материалом и рабочее место дезинфицируют, руки после дезинфекции моют с мылом
8. Работники баклаборатории подлежат обязательной вакцинации против тех заболеваний, возбудители которых могут встречаться в исследуемых объектах.
К основным методам микробиологии относятся:
• микроскопический — изучение морфологии микробов с использованием специальной микроскопической техники;
• бактериологический (культуральный) — получение чистых культур микробов и изучение их биологических свойств, позволяющие провести идентификацию, т.е. определение, вида микроба;
• серологический — выявление антител к возбудителям в биологических жидкостях организма больного (чаше в сыворотке крови; от лат. serum — сыворотка);
• аллергологический — оценка аллергических феноменов, возникающих в организме человека (на коже, слизистых оболочках или в крови) под действием компонентов или цельных клеток микроба-возбудителя;
• биологический — моделирование инфекционных процессов на лабораторных животных или куриных эмбрионах;
• молекулярно-биологический — изучение состава микробных нуклеиновых кислот с помошью полимеразной цепной реакции, сиквенирования и гибридизации ДНК.
Вопрос: Какие помещения должны располагаться в «заразной» и «чистой» зоне микробиологических лабораторий медицинских организаций?
Ответ: Определение понятий «заразная» и «чистая» зоны дана в п.2.3.7. Санитарно- эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»:
Помещения лабораторий разделяют на «заразную» зону, где осуществляются манипуляции с ПБА III-IV групп и их хранение, и «чистую» зону, где не проводят работы с микроорганизмами и их хранение.
В «чистой» зоне лабораторий должны располагаться следующие помещения: гардероб для верхней одежды; помещения для проведения подготовительных работ (препараторская, моечная, приготовление и разлив питательных сред и др.); помещение для стерилизации питательных сред и лабораторной посуды (стерилизационная); помещение с холодильной камерой или холодильниками для хранения питательных сред и диагностических препаратов; помещение для работы с документами и литературой; помещение для отдыха и приема пищи; кабинет заведующего; помещение для хранения и одевания рабочей одежды; подсобные помещения; туалет.
Для работы с ПБА III-IV групп в «заразной» зоне должны размещаться: помещение для приема и регистрации материала (проб); боксированные помещения с предбоксами или помещения, оснащенные боксами биологической безопасности; помещения для проведения бактериологических (вирусологических) исследований; помещения для проведения иммунологических исследований; помещение для люминесцентной микроскопии; помещение для паразитологических исследований; помещения для ПЦР-диагностики; термостатная комната; помещение для обеззараживания (автоклавная).
На границе «чистой» и «заразной» зон, во вновь строящихся или реконструируемых лабораториях, должно предусматриваться устройство санитарных пропускников.
Организация микробиологической лабораторной службы (Для студентов медицинского колледжа)
Описание презентации по отдельным слайдам:
Основы микробиологии и иммунологии МОМК №2, Остапова Т.С., 2018 г.
Организация микробиологической лабораторной службы
Основные понятия (введение) Структура микробиологической лаборатории Правила работы в микробиологической лаборатории Понятие о классах опасности микроорганизмов Принципы утилизации отходов микробиологической лаборатории Некоторые методические приемы бактериолога
Микробиологи имеют дело с популяциями (культурами) микроорганизмов, состоящими из миллионов особей. Культуру, содержащую микроорганизмы одного вида, называют чистой. Если в культуре содержится более одного вида микроорганизмов, она носит название смешанной. В микробиологической практике используют главным образом чистые культуры микроорганизмов. Ввиду того что в воздухе и на поверхности предметов (на столах, инструментах, одежде), а также на руках, волосах всегда имеется большое количество разнообразных микроорганизмов, следует постоянно заботиться о сохранении чистоты изучаемых культур. Требование чистоты культур в значительной степени определяет специфику устройства микробиологической лаборатории и правила работы микробиолога.
Асе́птика (греч. отрицательная приставка а- + septikos, вызывающий нагноение, гнилостный) — комплекс мероприятий, направленных на предупреждение попадания микроорганизмов. Асептика включает: а) стерилизацию инструментов, материалов, приборов и др.; б) специальную обработку рук персонала; в) соблюдение особых правил и приемов работы при проведении операций, исследований и др.; г) осуществление специальных санитарно-гигиенических и организационных мероприятий в лаборатории/лечебном учреждении/производстве.
Материал для фильтрования необходимо очистить от крупнодисперсных элементов путем предварительного фильтрования через бумажные фильтры или центрифугирования при небольших скоростях (2000— 4000 об/мин). Растворы, содержащие высокие концентрации белка, перед фильтрованием целесообразно развести. При применении керамических фильтров целесообразно вначале насытить фильтр той средой, в которой содержится взвесь бактерий. Керамические и стеклянные бактериальные фильтры после использования восстанавливают путем очистки и стерилизации. Для удаления органических остатков бактериальные фильтры прогревают в муфельной печи (тепло передается через стенки камеры, которой нагревается бактериальный фильтр. Керамические бактериальные фильтры для фильтрации стерилизуют в автоклаве, затем промывают в теплой воде, слабом растворе формалина и 15% растворе хлорной извести. Обработанные таким образом керамические биологические фильтры отмывают в водопроводной и дистиллированной воде и высушивают. Стеклянные биологические фильтры очищают путем фильтрования через них разведенных кислот, отмывают в водопроводной, а затем дистиллированной воде и стерилизуют в сушильном шкафу при t° 105°. Коллодийные пластинчатые биологические фильтры стерилизуют кипячением в течение 20 мин. Использованные коллодийные биологические фильтры не восстанавливают.
**Новая классификация ВОЗ: болезни, которые являются необычными и могут оказать серьёзное влияние на здоровье населения: оспа, полиомиелит, вызванный диким полиовирусом, человеческий грипп, вызванный новым подтипом, тяжелый острый респираторный синдром (ТОРС) или (SARS). болезни, любое событие с которыми всегда оценивается как опасное, поскольку эти инфекции обнаружили способность оказывать серьёзное влияние на здоровье населения и быстро распространяться в международных масштабах: холера, легочная форма чумы, желтая лихорадка, геморрагические лихорадки — лихорадка Ласса, Марбург, Эбола, лихорадка Западного Нила. Сюда же ММСП-2005 относят инфекционные болезни, которые представляют особую национальную и региональную проблему, например лихорадку денге, лихорадку Рифт-Валли, менингококковую болезнь (менингококковую инфекцию).
Чума Чума — острое инфекционное заболевание, вызываемое Yersinia pestis, относящееся к группе зоонозов. Источником инфекции являются грызуны (крысы, суслики, песчанки и др.) и больной человек. Заболевание протекает в формах бубонной, септической (редко) и легочной. Наиболее опасна легочная форма чумы. Возбудитель инфекции — чумная палочка, устойчивая во внешней среде, хорошо переносящая низкие температуры. Заражение происходит через укусы блох, которые паразитировали на больном животном, воздушно-капельным (легочная форма чумы) и пищевым путями (употребление в пищу мяса зараженных животных). Формы заболевания: локальная форма (бубонная) септическая форма легочная чума – самая опасная в эпидемиологическом плане В диагностике чумы важную роль играет бактериологический метод с выделением культуры возбудителя и его идентификацией.
Натуральная оспа Инфекционное вирусное заболевание, ООИ. Возбудителем оспы является ДНК-вирус (Poxvirus variola). Колонии вируса видны в световом микроскопе в виде элементарных телец, расположенных в цитоплазме эпителиальных клеток эпидермиса. Тельца Пашена — Морозова представляют собой мелкие кокковидные образования, тельца Гуарньери — более крупные образования, представляющие собой денатурированный белок в области скопления вирусных телец. Источник инфекции — больной человек в течение всего периода болезни. Возможны три формы натуральной оспы: •легкая форма — вариолоид или оспа без сыпи; •натуральная оспа обычного типа и сливная оспа •тяжелая геморрагическая форма, протекающая при явлениях кровоизлияний в элементы сыпи, вследствие чего последние становятся багрово-синими («черная оспа»). Последний случай заболевания был зафиксирован в 1977 году в Сомали. В различных странах мира начали планомерно отказываться от обязательного оспопрививания, а 8 мая 1980 года XXXIII Генеральной ассамблеей ООН было заявлено о полной и безоговорочной победе человечества над натуральной оспой.
Категории лабораторий В соответствии с делением микробов на группы по степени биологической опасности лаборатории также делят на категории. По номенклатуре ВОЗ выделяют 3 категории микробиологических лабораторий: 1) базовые (основные или общего типа) 2) режимные (изолированные), или лаборатории удержания 3) лаборатории особого режима (максимально изолированные) или лаборатории максимального удержания. В зависимости от основных задач лаборатории могут быть научно-исследовательскими, диагностическими или производственными. В системе органов здравоохранения имеются: • клинико-диагностические лаборатории общего или специального (биохимическая, бактериологическая, иммунологическая, цитологическая и др.) типов, входящие в состав больниц, поликлиник, диспансеров и других лечебно-профилактических учреждений; • бактериологические лаборатории Госсанэпиднадзора; • санитарно-бактериологические лаборатории ГСН; • санитарно-химические лаборатории ГСН; • центральные (ЦНИЛ), проблемные, отраслевые, учебные лаборатории вузов; • специализированные лаборатории (особо опасных инфекций и др.).
Работу с культурами возбудителей 1 и 2 групп можно проводить только в специальных лабораториях строгого режима с разрешения органов здравоохранения России. Работа с особо опасными микроорганизмами регламентируется специальной инструкцией и проводится в режимной лаборатории. Работа с возбудителями З и 4 групп проводится в соответствии с правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии в лабораториях СЭС и других бактериологических лабораториях.
Устройство микробиологической лаборатории Базовые лаборатории, работающие с патогенными биологическими агентами ( ПБА ) групп III и IV, должны располагаться в отдельном здании или в изолированной части здания. Они должны иметь два выхода: один для сотрудников, другой — для доставки материала для исследований (допускается передача материала через передаточное окно). должны иметь необходимый набор помещений в соответствии с производственной мощностью и номенклатурой выполняемых исследований.
Грязная зона микробиологических лабораторий Включает помещения для приёма и регистрации материала, боксы и комнаты для проведения микробиологических исследований, помещения для проведения серологических исследований, комната для проведения люминесцентной микроскопии, термостатная, автоклавная для обеззараживания материала. Окна и двери всех помещений должны герметично закрываться. Приточно-вытяжная вентиляция «грязной» зоны должна быть оборудована фильтрами тонкой очистки выбрасываемого воздуха. Помещения для проведения работ с живыми патогенными биологическими агентами должны быть оборудованы бактерицидными лампами. Обязательна маркировка автоклавов, столов, стеллажей для чистого и инфицированного материала. Покрытие лабораторной мебели, поверхности пола, стен и потолка должны быть гладкими и устойчивыми к действию моющих и дезинфицирующих средств.
Чистая зона микробиологических лабораторий включает гардероб для верхней одежды, комнаты отдыха, комнату для работы с документацией, комнату для надевания рабочей одежды, подсобные помещения, душевую, туалет, помещения для предварительных работ (препараторская, моечная, комната приготовления и разлива питательных сред и др.), стерилизационную, помещения с холодильниками для хранения питательных сред и диагностических препаратов. В «чистой» зоне возможна работа с неживыми патогенными биологическими агентами (серологические и биохимические исследования).
В структуру любой бактериологической лаборатории входят следующие помещения · лабораторные комнаты и боксы для работы в асептических условиях; · специально оборудованное помещение для стерилизации питательных сред, посуды, обеззараживания отработанного инфицированного материала; · моечная, оборудованная для мытья посуды; · помещение для приготовления питательных сред; · виварий – помещение, предназначенное для содержания лабораторных животных. Все помещения лаборатории должны иметь высоту не менее 3 м, быть обеспечены вентиляцией, водопроводом, канализацией, электроэнергией и, по возможности, газом. Стены должны быть окрашены масляной краской или покрыты кафельной плиткой, пол – линолеумом или кафельной плиткой.
Виды работ, которые могут привести к образованию аэрозолей, осуществляются в биологически безопасных боксах. Двери держатся закрытыми, на них изображены соответствующие знаки, предупреждающие о биологической опасности. Потенциально контаминированные отходы отделяются от общего потока отходов.
Обработка и удаления контаминированных материалов и отходов 1. Неконтаминированные (неинфекционные) отходы, которые могут быть повторно использованы или удалены вместе с общими «бытовыми» отходами. 2. Контаминированные (инфекционные) «колющие предметы» – иглы, скальпели, ножи и осколки стекла. Их во всех случаях необходимо складывать в контейнеры с твердыми стенками, снабженные крышкой и подлежащие обработке в качестве контаминированных.
3. Контаминированные материалы, предназначенные для деконтаминации путем автоклавирования, которые затем подвергаются мойке и используются повторно (Предварительную мойку контаминированных материалов, подлежащих автоклавированию и повторному использованию, не проводят. Любую необходимую очистку или ремонт проводят после автоклавирования или дезинфекции). 4. Контаминированные материалы, предназначенные для автоклавирования и удаления. 5. Контаминированные материалы, подлежащие сжиганию.
Помещение для приготовления питательных сред содержит: Электроплитку Автоматическую «варочную машину» см.рисунок Электрическую мешалку (магнитную мешалку) Шкафы для хранения сухих смесей и компонентов сред (специальных хим.реактивов) Запас посуды для приготовления сред Фильтровальную бумагу pH-метр Мерную посуду (колбы, цилиндры и др.) Весы для приготовления сухих навесок
Виварий Состоит обычно из пяти изолированных помещений (или групп помещений): а) для первичной обработки поступивших животных и их карантина; б) для содержания здоровых животных; в) для содержания подопытных животных; г) для мойки и стерилизации клеток, кормушек, поилок и т. п.; д) для приготовления пищи, хранения корма, материала для подстилок и т. п. В виварии предусматривают также лабораторию для проведения манипуляций и опытов, операционную для вскрытия животных, склад для инвентаря и помещение для обслуживающего персонала. Помещениям для животных, как и лабораториям, могут назначаться – на основе оценки рисков и с учетом группы риска исследуемых микроорганизмов – уровни биологической безопасности 1, 2, 3 и 4. SPF статус вивария (specific pathogen free) означает отсутствие видоспецифичных патогенных микроорганизмов, вызывающих различные инфекционные заболевания у мышей и крыс. Работа с животными в таких условиях позволяет четко ответить на вопрос, который ставится в исследовании. SPF – виварий делается с соблюдением жестких требований по стерильности, соответствующих международным стандартам. Ему присвоен седьмой класс чистоты по ISO. Всего классов девять. Для сравнения, первый представлен в бытовых помещениях, а пятый – в операционном блоке больниц. Многоступенчатая система защиты обеспечивает предотвращение занесения любых инфекций. Чистая зона содержания животных отделена от внешней среды автоклавом и специальным шлюзом.
Виварий При работе с заразными животными выдаются отдельные комплекты спецодежды для работы только в этих помещениях. Рядом с такими помещениями устраивают гардеробные с отделением для дезинфекции использованной спецодежды. Сотрудники вивария должны соблюдать правила личной гигиены (работа в масках, перчатках, тщательное мытье рук дезинфицирующими растворами и т. д.) во избежание заражения от животных. Трупы павших животных сжигаются. Сжигание необходимо проводить с согласия органов здравоохранения и защиты окружающей среды, а также ответственного за биологическую безопасность лаборатории. Нормативный документ: Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев) от 6 апреля 1973 г. N 1045-73
Специалисту, работающему в микробиологической лаборатории, необходимы навыки работы с множеством современной аппаратуры